Spectral Day Vilnius - tėkmės citometrijos specialistų diena

Vilniaus universiteto Medicinos mokslo centre vykusi „Spectral Day Vilnius“ subūrė tėkmės citometrijos specialistus, siekiančius išsamiau susipažinti su spektrinės citometrijos, realaus laiko ląstelių vaizdinimo ir pažangaus daugiaparametrių panelių kūrimo galimybėmis.

Teorines žinias patyrę lektoriai derino su praktinėmis įžvalgomis apie laboratorijų darbo eigą, duomenų interpretavimą ir panelių projektavimą. Diskusijos tęsėsi ir pasibaigus pranešimams – dalyviai gilinosi į konkrečius technologijų taikymo scenarijus, dalijosi patirtimi ir aptarė iššūkius, su kuriais susiduria atlikdami sudėtingus tėkmės citometrijos tyrimus.

Savo patirtimi renginyje dalijosi:

• dr. Mervi Reunanen – „Waters Biosciences“, anksčiau „BD Biosciences“, Šiaurės šalių pardavimų vadovė,
• dr. Dagbjort Petursdottir – „Waters Biosciences“, anksčiau „BD Biosciences“, Šiaurės šalių aplikacijų komandos vadovė,
• dr. Jochen Lamote – VIB tėkmės citometrijos centro Levene vadovas,
• Gert Van Isterdael – VIB tėkmės citometrijos centro Gente vadovas.

Pagrindinė renginio žinutė – šiuolaikinės citometrijos technologijos gali suteikti daugiau pasitikėjimo kiekvienu ląstelių populiacijos išskyrimo, rūšiavimo ir tolesnio tyrimo sprendimu.

Spektriniai duomenys ir ląstelių vaizdai

Viena iš svarbiausių renginyje paliestų temų - kaip pagerinti ląstelių duomenis, pasitelkiant naujausias technologijas. BD FACSDiscover™ prietaisų šeimoje BD SpectralFX™ technologija derinama su BD CellView™ vaizdinimo technologija. Tai leidžia analizuojant tuos pačius įvykius gauti ne tik didelio parametrų skaičiaus spektrinius duomenis, bet ir realiuoju laiku matyti atskirų ląstelių erdvines bei morfologines savybes.

Šios technologijos suteikia galimybę:

• vienu metu vertinti spektrinius fluorescencijos signalus ir ląstelių vaizdus,
• analizuoti ne tik ląstelės žymenų raišką, bet ir jos formą, struktūrą bei baltymų lokalizaciją,
• tiksliau atskirti biologiškai panašias, tačiau morfologiškai skirtingas populiacijas,
• kurti atrankos strategijas, pagrįstas fluorescencinėmis, erdvinėmis ir morfologinėmis savybėmis.

BD FACSDiscover™ S8 sistema papildomai leidžia ląsteles rūšiuoti remiantis ne tik įprastais citometrijos signalais, bet ir realiuoju laiku gaunamais jų vaizdais. Taip tyrėjas gali matyti analizuojamas ląsteles ir atrinkti tikslines populiacijas pagal anksčiau tradicinei tėkmės citometrijai neprieinamus požymius.

Kam tai naudinga:

• kai reikia patikimiau identifikuoti retas ląstelių populiacijas,
• kai vien fluorescencinių žymenų nepakanka tiksliam populiacijų atskyrimui,
• kai svarbu įvertinti ląstelių morfologiją ar baltymų išsidėstymą ląstelėje,
• kai atrinktos ląstelės bus naudojamos tolesniems funkciniams, molekuliniams ar kultivavimo tyrimams.

Vaizdinė informacija padeda geriau suprasti, kas iš tiesų patenka į pasirinktus analizės vartus, sumažinti nepageidaujamų įvykių įtraukimą ir išvengti dalies pakartotinių tyrimų. Tiksliau atrinkus ląsteles, tolesnius eksperimentus galima pradėti labiau pasitikint mėginio sudėtimi.

Švaresnis signalų atskyrimas

Renginyje taip pat pristatyti BD Horizon™ RealYellow™ ir RealBlue™ dažai, sukurti siekiant mažinti skirtingų lazerių sužadinamų signalų persidengimą. Mažesnis kryžminis sužadinimas ir išsiliejimas į kitus detektorius padeda švariau atskirti fluorescencinius signalus, ypač kuriant sudėtingas daugiaparametres paneles.

Šių reagentų savybės tampa ypač svarbios:

• kai viename tyrime naudojamas didelis skaičius fluorochromų,
• kai reikia aiškiai atskirti silpnai išreikštus biologinius žymenis,
• kai skirtingų ląstelių populiacijų signalai yra arti vienas kito,
• kai siekiama sumažinti signalo sklaidą ir padidinti panelės informatyvumą.

Biologijai tampant vis sudėtingesnei, tinkamas fluorochromų parinkimas gali turėti tiesioginės įtakos rezultatų raiškai, analizuojamų populiacijų atskyrimui ir galutinių išvadų patikimumui.

Lengviau atkuriama darbo eiga

Daug dėmesio renginyje skirta ir naujos kartos kokybės kontrolei, automatizuotam detektorių nustatymui bei supaprastintai spektrinės citometrijos darbo eigai.

Automatizavimas ir standartizuoti sistemos nustatymai padeda:

• greičiau parengti prietaisą darbui,
• mažinti nuo operatoriaus priklausančius rezultatų skirtumus,
• užtikrinti nuoseklesnį tyrimų atlikimą skirtingomis dienomis,
• lengviau perduoti sukurtas paneles kitiems komandos nariams,
• didinti sudėtingų daugiaparametrių tyrimų atkuriamumą.

Greita panelė yra vertinga tik tada, kai visa laboratorijos komanda gali ją patikimai atkartoti. Todėl modernios spektrinės citometrijos sprendimai apima ne vien didesnį parametrų skaičių, bet ir paprastesnį sistemos parengimą, kokybės kontrolę bei nuoseklesnę analizės eigą.

„Spectral Day Vilnius“ suteikė galimybę ne tik pristatyti pažangias technologijas, bet ir išsamiai aptarti, kaip vaizdinimu papildyta spektrinė citometrija gali būti pritaikyta konkrečiose laboratorijose – nuo sudėtingų panelių kūrimo ir retų populiacijų identifikavimo iki patikimesnio ląstelių rūšiavimo bei tolesnių tyrimų.

Dėkojame visiems renginio dalyviams už aktyvų įsitraukimą ir klausimus, o pranešėjams – už praktinėmis laboratorijų darbo eigomis pagrįstas įžvalgas.

Norėdami sužinoti, kokią vertę vaizdinimu papildyta spektrinės citometrijos darbo eiga galėtų sukurti jūsų laboratorijoje, susisiekite su „Laborama“ specialistais.